Pfano, puedes guardarlos en un congelador (-20ºC o mejor aún -80ºC) protegidos de la luz durante mucho tiempo, ¡décadas! En estado liofilizado y -20ºC y cubierto con papel de aluminio, ¡no debería ser un problema mantenerse estable durante sus vacaciones!
¿Cómo se almacena la imprimación liofilizada?
Para el almacenamiento a largo plazo, ya sea que los oligos se sequen o se resuspendan en agua no tratada con DEPC o tampón TE (Tris 10 mM, pH 8,0, EDTA 0,1 mM; como IDTE), es óptimo almacenarlos congelados a –20 °C. . Para el almacenamiento a temperatura ambiente o a 4 °C, los oligos que se resuspenden en tampón TE son más estables que los oligos secos.
¿Se pueden almacenar los primers liofilizados a temperatura ambiente?
El ADN generalmente se considera estable a temperatura ambiente durante aproximadamente 2 semanas, 4 °C durante aproximadamente 2 meses, -20 °C durante aproximadamente 2 años y -80 °C durante >10 años. De todos modos, se recomienda almacenar las imprimaciones liofilizadas a temperatura de nevera o congelador.
¿Dónde se deben almacenar las imprimaciones?
Los primarios se almacenarán en gabinetes. No se almacenarán más de 200,000 cebadores en un solo gabinete.
¿A qué temperatura se deben almacenar las imprimaciones?
Los cebadores, cuando están suspendidos, deben almacenarse en un congelador a -20 °C.
¿Los cebadores caducan?
Los productos para el rostro, como la prebase, la base y el rubor, suelen durar hasta 24 meses después de abrirlos.
¿Puedo mantener las imprimaciones a temperatura ambiente?
Dejo mis imprimaciones de uso frecuente a temperatura ambiente durante meses seguidos sin ningún problema. Pero si está preocupado, simplemente pida unos nuevos; probablemente esté viendo un gasto de $ 3. Durarán más en TE que en el agua, pero durante el fin de semana debería estar bien en cualquier caso.
¿Deben mantenerse los cebadores en hielo?
lo que conducirá a una amplificación inespecífica. Los cebadores de PCR pueden degradarse debido a la actividad exonucleasa de 3′ a 5′ de la polimerasa de ADN Pfu o las mezclas de enzimas de PCR. Por lo tanto, las mezclas de PCR deben mantenerse en hielo durante la configuración de la reacción y la polimerasa o la mezcla deben ser el último componente que se agregue a la mezcla de reacción.
¿Caducan los cebadores de PCR?
La temperatura es la más importante de las 2 variables. En general, los oligos deben almacenarse a –20 °C. A esta temperatura, un oligo tiene una vida útil mínima de 2 años, ya sea que se almacene seco/liofilizado, en tampón TE o en agua (no tratada con DEPC).
¿Qué puedo usar para resuspender los primers?
Recomendamos volver a suspender los oligos en una solución tampón TE, como IDTE, para mantener un pH constante que apoye la estabilidad de los oligos (IDTE está disponible en IDT a pH 7,5 y pH 8,0). Como alternativa, vuelva a suspender los oligos en agua estéril libre de nucleasas, pH 7,0 (es preferible el grado HPLC; disponible en IDT).
¿Cuánto tiempo puede almacenar las imprimaciones?
El almacenamiento a -20oC brinda estabilidad a los cebadores durante aproximadamente un año. No debe esperar ninguna degradación significativa o pérdida de calidad en el almacenamiento a -80 °C, incluso después de 2 años. La única preocupación debe ser que los cebadores se almacenen en múltiples alícuotas para evitar que todo el stock se descongele y congele repetidamente.
¿Se pueden congelar cebadores liofilizados?
Pfano, puedes guardarlos en un congelador (-20ºC o mejor aún -80ºC) protegidos de la luz durante mucho tiempo, ¡décadas!
¿Los oligos necesitan ser refrigerados?
La mejor práctica es almacenar los oligos en un congelador (–20 °C) en tampón TE, agua libre de nucleasas o secado hasta por 24 meses. También es una buena práctica minimizar la exposición de oligo a la luz ultravioleta.
¿Cuánto tiempo pueden durar los primers liofilizados?
Los oligos que se almacenan en agua son los menos estables. Sin embargo, a 4 °C, los oligos almacenados en todas estas condiciones son estables durante al menos 60 semanas. Además, es ideal para almacenar oligos en la oscuridad.
¿Se pueden aplicar imprimaciones en vórtice?
No agites demasiado. Pero puede agitar suavemente durante 5-10 para una mezcla adecuada. No rompería los cebadores.
¿Cuánto tiempo puede mantener el ADNc a 4 grados?
sin ningún efecto adverso siempre y cuando lo mantengas estéril (por supuesto). Una vez, almacené cDNA a 4°C durante tres meses. Sin embargo, descubrí que el ADNc es bueno cuando lo usé. Por lo tanto, puede almacenar ADNc a 4 °C en una semana o más tiempo.
¿Cuántas veces puedo congelar las imprimaciones descongeladas?
Alícuota de los cebadores resuspendidos en stocks de trabajo. Esto elimina la necesidad de dañar los ciclos de congelación/descongelación del stock maestro ya que los stocks de trabajo se pueden sacar del congelador de tres a cinco veces sin degradar el ADN.
¿Cómo sabes si tu imprimación está caducada?
Una de las formas seguras de saber si un producto está caducado es oliéndolo. Antes de aplicar el producto, acércalo a tu nariz y huélelo. Si el producto tiene un olor peculiar o huele un poco mal, es posible que haya caducado.
¿Cómo se hace una imprimación de stock de 100um?
Para determinar la cantidad de agua que se debe agregar al cebador liofilizado, simplemente multiplique el número de nmol de cebador en el tubo por 10. Esa será la cantidad de agua que se agregará para hacer una reserva de cebador de 100 µM. Por ejemplo, si hay 38,2 nmol de imprimación, se crea una reserva de imprimación de 100 µM añadiendo 382 µl de agua.
¿Por qué los reactivos de PCR se almacenan en hielo en todo momento?
Mantener los reactivos fríos durante la configuración de la PCR protegerá las muestras y los reactivos intactos sin degradación y producirá los resultados más sensibles y consistentes.
¿Por qué los tubos de PCR se mantienen en hielo?
Las mezclas de PCR deben prepararse en hielo para evitar recocidos no específicos y subproductos no deseados. Esto no es necesario cuando utiliza una ADN polimerasa Hot Start que se inactiva a temperaturas más bajas. Para conocer el protocolo de activación adecuado, consulte el manual del fabricante.
¿Cuáles son los 4 pasos de la PCR?
Explicación de los pasos de PCR
Paso 1 – Desnaturalización. La solución contenida en el tubo se calienta a por lo menos 94 °C (201,2 °F) usando un termociclador.
Paso 2 – Recocido.
Paso 3 – Extensión.
Paso 4 – Análisis con Electroforesis.
¿Por qué resuspendemos las existencias de cebadores en tampón TE en lugar de agua?
TE es una buena opción para resuspender el ADN de reserva de alta concentración (como los cebadores de PCR de 100 uM) porque sabe que A) “protegerá” su ADN a largo plazo mediante la amortiguación y la quelación, y B) puede diluir las reservas de TE de alta concentración para que funcionen. concentraciones con H2O más tarde, diluyendo simultáneamente la concentración de TE/EDTA.
¿Cuánto tiempo se puede almacenar el ADNc?
Sí, puede almacenar cDNA en -40 durante más de 6 meses, incluso varios años. También puede almacenar en -80 durante un período muy largo. La calidad del cDNA seguirá siendo buena siempre que lo manipule bien, preferiblemente asegúrese de descongelarlo en hielo.