Sumergir la punta unos pocos milímetros por debajo de la superficie de la solución que se aspira en la pipeta. El pipeteo es más preciso cuando la pipeta se sostiene verticalmente.
¿Cómo sé qué micropipeta usar?
Como regla general, elija siempre la pipeta más pequeña capaz de manejar el volumen requerido. Esto es importante porque la precisión disminuye cuando el volumen establecido está cerca de la capacidad mínima de la pipeta. Por ejemplo, si dispensa 50 µl con una pipeta de 5000 µl, obtendrá resultados bastante pobres.
¿Qué precisión debe tener una micropipeta?
Cuando se calibran las micropipetas, la precisión normalmente se expresa como un porcentaje del valor seleccionado. Las micropipetas están diseñadas para operar con precisiones dentro de un pequeño porcentaje (generalmente <3%) del valor previsto. ¿Cómo saber si una micropipeta es exacta o precisa? Una pipeta es precisa en la medida en que el volumen entregado es igual al volumen especificado. La precisión, por otro lado, se refiere a la proximidad de varias mediciones entre sí, en lugar de a un valor estándar, que es la reproducibilidad de las muestras pipeteadas. ¿Cuál es la técnica de pipeteo más eficaz para garantizar la precisión? Utilice el pipeteo en modo estándar El pipeteo en modo estándar (o directo) produce una mejor exactitud y precisión que el modo inverso para todos los líquidos, excepto para los líquidos viscosos o volátiles. El modo inverso a menudo da como resultado una entrega excesiva. ¿Cómo puedo mejorar la precisión de mi pipeteo? Pre-humedecer la punta de la pipeta. Aspire y expulse completamente una cantidad de líquido al menos tres veces antes de aspirar para la entrega. Examine la punta de la pipeta en busca de gotas. Pausa constantemente. Minimice la manipulación de la pipeta y la punta. Utilice la punta de pipeta correcta. ¿Por qué debería evitar tocar las puntas de las micropipetas? Evite tocar la punta (especialmente el extremo más delgado), porque las puntas son estériles. Presione el émbolo de la micropipeta hasta el PRIMER tope. a menos de 20 ̊ de la vertical para obtener los mejores resultados. que el volumen completo de la muestra ha entrado en la punta. ¿Por qué las pipetas no son precisas? Aprenda cómo funciona su pipeta La temperatura y la presión afectan el volumen del colchón de aire, lo que afecta la precisión del pipeteo. Además, los solventes volátiles pueden evaporarse en el colchón de aire, lo que conduce a un volumen dispensado inexacto e inferior al que se muestra en la pipeta. ¿Por qué una pipeta es más precisa? ¿Por qué las pipetas volumétricas son más precisas? La pipeta volumétrica es más precisa porque su tamaño largo disminuye el error de leer mal el menisco y las pipetas volumétricas están diseñadas para medir volúmenes específicos (como 5 ml). Además, los cilindros graduados no se calibran durante el proceso de fabricación. ¿Es una bureta exacta o precisa? El tubo de bureta lleva marcas graduadas a partir de las cuales se puede determinar el volumen dispensado del líquido. En comparación con una pipeta volumétrica, una bureta tiene una precisión similar si se usa a su máxima capacidad, pero como generalmente se usa para administrar menos de su capacidad total, una bureta es un poco menos precisa que una pipeta. ¿Por qué no puedes dejar caer una micropipeta? Es importante un sello firme entre la punta y la pipeta, de lo contrario, la cantidad de solución que extraiga será inexacta. Si la punta se cae, deséchela. Una punta estéril es necesaria para los experimentos, de lo contrario la contaminación arruinará su resultado. ¿Cuál es la mayor fuente de problemas de pipeteo? El error humano es la principal fuente de problemas de pipeteo, seguido de líquidos adheridos a las puntas y pérdida de precisión cuando se trabaja con líquidos viscosos (pregunta de selección de opciones múltiples, el gráfico muestra el porcentaje de encuestados que experimentaron estos diversos errores de pipeteo). ¿Qué no debes hacer con una micropipeta? 10 formas de abusar de una pipeta Olvidando tu cabeza. Cuando utilice una pipeta, utilice siempre una punta. El tipo equivocado para el trabajo. Asegúrese de que su punta sea la correcta para el volumen que está pipeteando. Empujándolo demasiado lejos. Es una pipeta, no un émbolo. Dejándolo tirado. Usándolo como un rascador de espalda. Sujetándolo mal. Marcarlo. ¿Cuál es la pipeta más precisa? La pipeta volumétrica sigue siendo la más precisa del mundo. ¿Dónde se utilizan las micropipetas? Las micropipetas se utilizan generalmente en laboratorios de microbiología, química y pruebas médicas para la transferencia exacta y precisa de muestras. Cuando use una micropipeta, si empuja hasta la segunda parada para llenarla, ¿lo hará? Él dice que empujar hasta el segundo tope estropea la aspiradora y hace que aspires más líquido la próxima vez que la uses. Si no cambia las puntas, es mejor dejar un poco de líquido en la punta. ¿Por qué la bureta es más precisa? Las buretas son más grandes que una pipeta, tiene una llave de paso en la parte inferior para controlar la liberación de líquido. La bureta es similar a un cilindro graduado y es más fácil medir un volumen requerido de líquido a través de graduaciones. Pero tiene un menisco grande y, por lo tanto, su exactitud y precisión es menor en la medición de líquidos. ¿Qué material de vidrio es más preciso? Las pipetas volumétricas, matraces y buretas son las más precisas; los fabricantes de cristalería los calibran con un alto nivel de precisión. La precisión generalmente se mide en términos de tolerancia, que es la incertidumbre en una medición realizada con la cristalería. ¿Por qué el cilindro graduado es más preciso? ¿Por qué una probeta graduada es más precisa que un vaso de precipitados? La precisión de un cilindro graduado es mayor porque las graduaciones en el cilindro facilitan llenar, verter, medir y leer con mayor precisión la cantidad de líquido que contiene. ¿Es preciso el pipeteo inverso? El pipeteo inverso es más preciso en la dispensación de pequeños volúmenes de líquidos que contienen proteínas y soluciones biológicas en comparación con el pipeteo directo, que se utiliza principalmente para soluciones acuosas, como tampones, ácidos diluidos o álcalis. ¿Por qué debería usar siempre una punta desechable en una micropipeta? Consejo. En muchas micropipetas, la punta es desechable. Esto permite que la micropipeta se use varias veces seguidas sin necesidad de limpiarla y secarla cada vez. ¿Cuáles son los factores que afectan el rendimiento del pipeteo? Factores que afectan la precisión de la pipeta La temperatura. La temperatura tiene muchos efectos en la precisión del pipeteo. Densidad. La densidad (relación masa/volumen) afecta el volumen de líquido que se aspira en la punta. Altitud. La altitud geográfica afecta la precisión a través de la presión del aire. ¿Por qué nunca debe dejar que el émbolo de una micropipeta vuelva a su lugar? Nunca invierta ni coloque una pipeta con la punta llena (el líquido puede entrar en el cilindro). Nunca permita que el émbolo retroceda bruscamente después de extraer o expulsar fluido (podría dañar el pistón o hacer que el fluido ingrese al cilindro y entre en contacto con el pistón, también conocido como "fuente"). ¿Por qué debería evitar sumergir demasiado la punta de la micropipeta en el líquido? ¿Por qué debería evitar sumergir demasiado la punta de la micropipeta en el líquido? – Debemos evitar sumergir la punta de la micropipeta demasiado profundamente en el líquido debido a que una inmersión excesiva hará que el líquido se adhiera al exterior de la punta y se administrará más líquido del deseado. ¿Cómo se invierte el pipeteo? Cómo invertir la pipeta Ajuste la pipeta al volumen deseado. Presione el émbolo por completo, más allá del primer tope hasta el segundo tope (explosión). Sumerja la punta en el líquido y suelte lentamente el émbolo hasta que se extienda por completo. Dispensar presionando hasta el primer tope. Quedará un pequeño volumen de líquido en la punta.